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技術(shù)文章
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技術(shù)文章
2016-318
首先引物與模板的序列要緊密互補，其次引物不能在模板的非目的位點引發(fā)DNA聚合反應(yīng)(即錯配)，再次引物與引物之間避免形成穩(wěn)定的二聚體或發(fā)夾結(jié)構(gòu)。引物設(shè)計應(yīng)注意如下要點：1.引物的長度一般為15-30bp，常用的是18-27bp。2.引物序列在模板內(nèi)應(yīng)當沒有相似性較高，尤其是3’端相似性較高的序列，否則容易導致錯配。引物3’端出現(xiàn)3個以上的連續(xù)堿基，如GGG或CCC，也會使錯誤引發(fā)機率增加。3.引物3’端的末位堿基對Taq酶的DNA合成效率有較大的影響。不同的末位堿基在錯配位置導...
查看更多2016-318
蠕動泵引起這種現(xiàn)象的主要原因是系統(tǒng)內(nèi)存在氣泡。此時需要仔細檢查輸液管與泵頭下閥是否擰緊，四氟管有無裂紋等，因為液體在流動時，在流經(jīng)處產(chǎn)生微小的負壓，空氣會進入系統(tǒng)。當檢查完確認以后，將放空閥逆時針旋轉(zhuǎn)一圈左右后，用手按住運行鍵，此時，泵以zui高的流速從排空閥流出，氣泡隨之流出。當泵頭經(jīng)過清洗后，或者更換流動相時，必須要經(jīng)過這一相操作。此法效果不佳時，可以將主泵頭上閥的壓帽松開一點(約三分之一圈左右)存在單向閥內(nèi)的氣泡就可以排除。當儀器是新購買或較長時間沒有使用，有時也會出現(xiàn)...
查看更多2016-317
蠕動泵的原理簡介：蠕動泵由于輸出的流量非常穩(wěn)定因此又叫恒流泵，由于蠕動泵是靠擠壓軟管而達到泵送流體的功能的因此又叫軟管泵。蠕動泵的機械原理十分簡單。它是由轉(zhuǎn)輪擠壓著泵管并轉(zhuǎn)動從而推動管內(nèi)的流體向前移動從而產(chǎn)生流體流動的，就象用兩根手指夾擠一跟充滿液體的軟管一樣，隨著手指的移動，管內(nèi)形成負壓，液體隨之流動。蠕動泵這種產(chǎn)品由于具有恒流泵功能和潔凈操控方便等多種功能，因此在各種行業(yè)都有著廣泛的應(yīng)用。生物醫(yī)藥溶劑、酸、堿、植物提煉液、軟膏、血漿石油、化工酸、堿、溶劑、懸浮物、分散體系...
查看更多2016-317
旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀是實驗室和科研機構(gòu)常用的儀器設(shè)備，下面我們就來了解一下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀的結(jié)構(gòu)和工作原理是怎樣的。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀結(jié)構(gòu)原理：結(jié)構(gòu)：蒸餾燒瓶是一個帶有標準磨口接口的茄形或圓底燒瓶，通過一高度回流蛇形冷凝管與減壓泵相連，回流冷凝管另一開口與帶有磨口的接收燒瓶相連，用于接收被蒸發(fā)的有機溶劑。在冷凝管與減壓泵之間有一三通活塞，當體系與大氣相通時，可以將蒸餾燒瓶，接液燒瓶取下，轉(zhuǎn)移溶劑，當體系與減壓泵相通時，則體系應(yīng)處于減壓狀態(tài)。使用時，應(yīng)先減壓，再開動電動機轉(zhuǎn)動蒸餾燒瓶，結(jié)束時，應(yīng)先停機...
查看更多2016-316
PCR擴增后一般進行瓊脂糖凝膠電泳分析，電泳后一般有以下幾種條帶：1、引物帶。引物濃度過高或是擴增效率不是特別高時都會有，一般不呈現(xiàn)為細帶，為發(fā)散狀；如果目的擴增產(chǎn)物帶和引物帶都很亮，可以考慮適當降低引物量。2、引物二聚體帶。比引物跑得慢一點，條帶清晰，但如果擴增產(chǎn)物小于100bp時，產(chǎn)物與引物二聚體就不好分別了，建議采用DNA聚丙烯酰胺電泳（不是蛋白質(zhì)的SDS聚丙烯酰胺電泳）；如果引物二聚體在優(yōu)化復性溫度后仍然嚴重影響目的產(chǎn)物的擴增，優(yōu)先考慮更換引物設(shè)計（因為引物合成的成本...
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